Ezio Auditore, Roma, Vatikan’daki sırrı keşfettikten sonra amcası Mario ile birlikte Monteriggioni’ye dönerler. Artık herşey normale dönmüştür. Kız kardeşi Ezio’ya bir doğum günü partisi hazırlar. Gecesinde ise Ezio, Caterina ile birlikte olur.
Sabah top sesiyle uyanırlar. Bunu bir talim zanneden Ezio önemsemez ancak tam o anda pencereden içeri bir gülle gelir. Ezio’nun zırhı parçalanır. Ezio, Caterina’yı güvenli bir yere gönderirken kendide çatıya çıkar ve o hazin tabloyu görür. Papa Rodrigo Borgia’nın oğlu Cesare Borgia şehri yıkmaktadır.
Şehri savunmaya çalışan Ezio birçok düşman birliğine karşı koymuştur. Ancak orduların başına geçen amcası Mario yakalanmıştır. Bu sayede Cesare, Apple of Eden’ı almıştır. Bunu gören Ezio amcasını kurtarmak için koşmaya başlar ancak Cesare eline aldığı tabancayla Mario’yu öldürür. O anda ise çatıdaki tüfekçiler Ezio’yu da sol omzundan vurur.
Ezio uyandığında kardeşini, annesini ve şehirde hayatta kalanları gizli geçitten kaçırır. İntikam yemini eden Ezio, Roma’ya Cesare’nin yaşadığı yere gider. Para, asker, silah gibi kaynaklarını keserek Cesare’yi güçsüz bırakır.
Oyun Assasin’s Creed 2 oynanış sistemine benzemektedir. Roma şehrinde her yere tırmanılabilmektedir. Ayrıca yapımcılar Roma haritasının Floransa haritasının 3 katı olduğunu görünce Roma’nın içinde at kullanmaya izin vermişler. Oyunda suikastçi yardımcılar da edinebilmektedir. Yardımcı edinebilmek için ilk önce bölgedeki Assassin’s Recruit’i tamamlamanması gerekmektedir. Eğer sivil suikastçi olmayı kabul ederse bir törenle suikastçi yapılmaktadır. Assasin’s Creed 1’de bulunan Bayrak toplama bu oyunda da bulunmaktadır. Oyunda ilave silah olarak Tatar Yayı bulunmaktadır. Assasin’s Creed 2’ye göre Counter-Attack sayısı daha fazladır.
Minimum Sistem Gereksinimleri;
* İşletim Sistemi: Windows® XP
* İşlemci: Intel Core® 2 Duo 1.8 GHZ
* Bellek: 1.5 GB Windows® XP / 2 GB Windows Vista® – Windows 7®
* Ekran Kartı: 256 MB DirectX® 9.0– (Shader Model 3.0 uyumlu) Veya yükseği
* DirectX®: 9.0
* Hard Disk: 8 GB
* Ses: DirectX 9.0 uyumlu ses kartı